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LncRNA測序服務(wù)說明

LncRNA測序技術(shù)簡介
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技術(shù)簡介
       長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA, lncRNA) 是一類長度在200-100000 nt之間的RNA分子。它們不參與蛋白質(zhì)的編碼,但是在細(xì)胞內(nèi)起著重要的調(diào)控作用。已有的研究表明lncRNA參與X染色體沉默,基因組印記,表觀遺傳修飾,轉(zhuǎn)錄激活等多種生物學(xué)過程,越來越成為非編碼RNA研究領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。LncRAN測序就是采用高通量測序技術(shù)結(jié)合生物信息分析,一次性獲得樣本中的lncRNA和mRNA信息,對lncRNA的類別,表達(dá)和功能進(jìn)行深入分析的方法。
 
技術(shù)優(yōu)勢
  •         LncRNAseq可利用一份RNA樣品,同時(shí)獲得lncRNA和mRNA的測序數(shù)據(jù)。
  •         鑒定已知lncRNA的同時(shí),可以預(yù)測新的lncRNA.
  •         信息量大,可進(jìn)行mRNA和lncRNA共表達(dá)分析
 
 
應(yīng)用領(lǐng)域
  •         快速鑒定不同物種、不同組織、不同發(fā)育階段、不同疾病狀態(tài)下已知和未知的lncRNA及其表達(dá)差異
  •         lncRNA編輯、新lncRNA預(yù)測及l(fā)ncRNA靶基因分析
 
 
技術(shù)參數(shù)與實(shí)驗(yàn)流程
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技術(shù)參數(shù)
樣品要求 文庫類型 測序策略 數(shù)據(jù)要求
Total RNA,總量>2ug,濃度≥ 50 ng/μL;RNA無明顯降解 (28S:18S>1.8;RIN>7)
  • Poly(A)+鏈特異性文庫
  • rRNA去除+鏈特異性文庫
  • Illumina HiSeq PE150;10G數(shù)據(jù)量
  • 數(shù)據(jù)預(yù)處理
  • 數(shù)據(jù)整體質(zhì)量評估
  • LncRNA表達(dá)水平分析
  • LncRNA差異表達(dá)分析
  • LncRNA靶基因預(yù)測
  • LncRNA靶基因差異表達(dá)分析
  • 靶基因富集分析
  • 個(gè)性化分析

實(shí)驗(yàn)路線


數(shù)據(jù)分析內(nèi)容

生物信息分析內(nèi)容
  • 數(shù)據(jù)預(yù)處理
  • 數(shù)據(jù)整體質(zhì)量評估
  • LncRNA表達(dá)水平分析
  • LncRNA差異表達(dá)分析
  • LncRNA靶基因預(yù)測
  • LncRNA靶基因差異表達(dá)分析
  • 靶基因富集分析
  • 個(gè)性化分析
經(jīng)典文章解讀
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【復(fù)雜疾病】lncRNA測序解析銀屑病皮膚組織特異性表達(dá)和表觀調(diào)控機(jī)制

研究背景:目前,多數(shù)自身免疫疾病的組學(xué)研究主要關(guān)注點(diǎn)仍然是蛋白編碼mRNA。

研究方法:收集99例銀屑病皮損組織(PP),27例皮損旁正常組織(PN)和90例健康對照皮膚組織(NN),完成RNA-seq實(shí)驗(yàn),生物信息學(xué)技術(shù)平臺分析lncRNA的數(shù)據(jù)。

研究結(jié)果:1. 檢測到皮膚特異性lncRNA,已注釋的2942個(gè),首次報(bào)道的1080個(gè)。 2. 超過40%的新LncRNA存在差異表達(dá)(PP vs. PN;PP vs. NN),而存在差異表達(dá)的mRNA和已注釋lncRNA的比例則相對較低。 3. 很多差異表達(dá)lncRNA與免疫功能相關(guān)基因存在共表達(dá),并且新lncRNA靶基因呈現(xiàn) 表皮分化復(fù)合物基因富集現(xiàn)象。
研究結(jié)論:很多l(xiāng)ncRNA參與了銀屑病的發(fā)生發(fā)展,本研究為后續(xù)的皮膚lncRNA功能研究提供了重要的參考。
圖1:本研究的設(shè)計(jì)思路
 
圖2 不同類型轉(zhuǎn)錄本的皮膚組織特異性
 
參考文獻(xiàn):Tsoi L C, Iyer M K, Stuart P E, et al. Analysis of long non-coding RNAs highlights tissue-specific expression patterns and epigenetic profiles in normal and psoriatic skin[J]. Genome Biology, 2015, 16(1):1-15.  
 
 
 
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