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DNA甲基化測(cè)序

       DNA的甲基化修飾是基因表達(dá)調(diào)控的一種重要手段,基因組DNA甲基化分布的有序建立和維持對(duì)保證個(gè)體正常發(fā)育至關(guān)重要,相反,如果這套甲基化調(diào)控機(jī)制出現(xiàn)問(wèn)題,細(xì)胞功能將發(fā)生不正常改變,可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變,因此基因甲基化研究是腫瘤機(jī)制研究中的一大熱點(diǎn)。DNA的甲基化主要發(fā)生在CpG島,其甲基化狀態(tài)的確定可以通過(guò)DNA甲基化測(cè)序的方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。

技術(shù)方法:
我們將樣本經(jīng)Bisulfite處理后,甲基化的胞嘧啶(C)保持不變,但非甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化成脲嘧啶,因此在利用該處理產(chǎn)物作為模板的PCR產(chǎn)物中,甲基化的胞嘧啶還是胞嘧啶,但非甲基化胞嘧啶變成了胸腺嘧啶,通過(guò)測(cè)序可以很容易看出目的片斷哪些胞嘧啶是甲基化的,哪些沒(méi)有,而且還可以對(duì)甲基化比例作初步分析。其技術(shù)原理簡(jiǎn)圖如下:

 
應(yīng)用領(lǐng)域:
此方法廣泛應(yīng)用于腫瘤基因組學(xué)和疾病基因組學(xué)的研究。
 
檢測(cè)對(duì)象:
DNA樣本
 
服務(wù)內(nèi)容:
  1. DNA樣本的質(zhì)檢與標(biāo)化;
  2. 引物的設(shè)計(jì)、合成與優(yōu)化;
  3. DNA的Bisulfite處理;
  4. 目的CpG島擴(kuò)增與測(cè)序;
  5. 測(cè)序結(jié)果分析與整理。
檢測(cè)實(shí)例:
甲基化處理樣本(TOP)和全擴(kuò)樣本(BOTTOM)的BISULFITE SEQUENCING圖
 

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