從某一特定組織細胞中獲得可供分子生物學研究實驗的總RNA。
技術(shù)方法:
針對不同樣品類型進行預處理后,使用Trizol (Invitrogen)試劑進行抽提總RNA。對于石蠟塊/切片中RNA的抽提,采用高濃度蛋白酶消化處理后,經(jīng)酚-氯仿-異戊醇抽提后用無水乙醇沉淀析出、溶解。 根據(jù)客戶要求,TRIZOL抽提的RNA也可用DNase I處理,去除DNA。根據(jù)客戶要求可以使用特定試劑盒抽提RNA,并進行后續(xù)RNA質(zhì)控。 應用領(lǐng)域: 涉及分子生物學和基因組學表達水平分析及基因功能研究的以RNA為分析對象的實驗研究領(lǐng)域。
樣本要求:
新鮮血液/組織/培養(yǎng)細胞(離體/收集后非冷凍狀態(tài)下0.5-2小時內(nèi))、液氮保存的組織/分離白細胞/培養(yǎng)細胞、RNAlater充分浸透保護的組織/分離白細胞/培養(yǎng)細胞(低溫保存一個星期之內(nèi))、Trizol充分裂解后的組織/分離白細胞/培養(yǎng)細胞(低溫保存3天之內(nèi))、經(jīng)福爾馬林固定的組織石蠟包埋塊(優(yōu)先)或石蠟切片。每次抽提的樣本用量:組織為<100mg左右,血液<1ml, 分離白細胞或培養(yǎng)細胞<1x107個,石蠟包埋塊一塊,石蠟切片6張以上。 服務內(nèi)容:
圖1. 原理圖
檢測實例:
瓊脂糖凝膠電泳檢測 RNA樣本的抽提效果 |