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AccuCopy——準確快速CNV多重檢測新技術(shù)

本試劑盒采用上海天昊生物科技有限公司開發(fā)的AccuCopy®多重基因拷貝數(shù)檢測專利技術(shù)，根據(jù)客戶項目要求合成特異引物和競爭模板，以及優(yōu)化PCR反應(yīng)體系后組裝而成。

該專利技術(shù)原理說明見圖1：取一定量的競爭DNA片段混合物----每個片段與各自對應(yīng)基因片段僅有微小差別（通常為幾個堿基長度差異），然后與合適量的樣本DNA混合，作為隨后多重?zé)晒飧偁幮訮CR擴增的模板；多重PCR產(chǎn)物經(jīng)毛細管電泳后對不同基因位點擴增產(chǎn)物以及同一位點的不同模板（樣本DNA與競爭DNA）擴增產(chǎn)物根據(jù)其長度差異進行分離；分析每個基因片段的S/I值，利用參照基因S/I值對目標基因S/I值進行校正后獲取目標基因的準確拷貝數(shù)。 與其它拷貝數(shù)檢測技術(shù)如qRT-PCR和MLPA相比，該檢測專利技術(shù)具備低成本、高效率、高準確性的優(yōu)勢。PCR擴增產(chǎn)物用ABI3130XL進行毛細管電泳，原始數(shù)據(jù)文件采用GeneMapper4.0（Appliedbiosystems）進行目標峰高及峰面積數(shù)據(jù)讀取，輸出數(shù)據(jù)采用EXCEL進行處理分析。
 
圖1： AccuCopy®多重CNV檢測技術(shù)原理：利用內(nèi)對照DNA校正不同片段的擴增效率的差異，參照基因R來作為2拷貝的內(nèi)參基因，用于拷貝數(shù)絕對定量。數(shù)據(jù)處理時，使用目的峰面積S/內(nèi)對照DNA峰I，再用參照基因R進行標化2拷貝，目的基因片段的拷貝數(shù)便可以精確定量了。

圖2：AccuCopy®在1個體系中進行10個目的片段多重定量檢測的熒光毛細管電泳圖。
 
 
圖3： 各種基因拷貝數(shù)檢測技術(shù)的參數(shù)比較
 
天昊生物自主專利技術(shù)
◣多重檢測可將12個片段融入1個檢測體系，其中9個檢測目的片段，3個參照基因片段。
◣最為準確的CNV拷貝數(shù)定量檢測方法，平均檢測誤差<5%。
◣高靈敏度：可以準確定量高達6個拷貝的目的片段。
◣高通量：實驗反應(yīng)只需4個小時。
◣低成本：無需大量重復(fù)，多重實驗為您大大節(jié)省實驗成本。
◣高靈活性：可根據(jù)客戶需求進行設(shè)計合成Customer Design Panel及試劑盒，您只需擁有熒光毛細管電泳儀就可以輕松實現(xiàn)高效的拷貝數(shù)多重檢測。省去繁瑣的國外定制流程，更快速、更便宜。
 
 
研究實例：

圖4：AccuCopy®檢測實例I：染色體21、X、Y拷貝數(shù)檢測，參照基因POP1。
 
Catalogue No. 包裝
CN0105KS 250個反應(yīng)
CN0105KM 500個反應(yīng)
CN0105KL 1000個反應(yīng)
試劑盒定制流程：
  1. 提供相應(yīng)數(shù)量的CNV及其在GRCh37版本數(shù)據(jù)庫中染色體上的相應(yīng)位置。
  2. 利用軟件初步設(shè)計CNV之后與客戶聯(lián)系確定最終納入AccuCopy檢測體系的CNV探針位置。
  3. 客戶確認檢測體系信息后，簽訂試劑定制合同，將客戶確認的體系信息提交生產(chǎn)部，定制產(chǎn)品全款到賬后生產(chǎn)部立即開始合成生產(chǎn)。
  4. 產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后，我們會立即通知客戶安排發(fā)貨。
 
試劑盒中包括具體的試劑說明、標準的實驗體系條件、所需實驗儀器列表、數(shù)據(jù)判讀方法和標準，但不包含數(shù)據(jù)判讀所用軟件。
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