圖1. Illumina GAIIx
測(cè)序原理:
測(cè)序時(shí)將基因組DNA的隨機(jī)片段附著到光學(xué)透明的玻璃表面(即Flow cell),這些DNA片段經(jīng)過(guò)延伸和橋式擴(kuò)增后,在Flow cell上形成了數(shù)以億計(jì)Cluster,每個(gè)Cluster是具有數(shù)千份相同模板的單分子簇。然后利用帶熒光基團(tuán)的四種特殊脫氧核糖核苷酸,通過(guò)可逆性終止的SBS(邊合成邊測(cè)序)技術(shù)對(duì)待測(cè)的模板DNA進(jìn)行測(cè)序。這種新方法確保了高精確度和真實(shí)的一個(gè)堿基接一個(gè)堿基的測(cè)序,排除序列方面的特殊錯(cuò)誤,為同聚物和重復(fù)序列的測(cè)序提供了一個(gè)很好的解決方案。
性能特點(diǎn):
• 測(cè)序通量高:每個(gè)測(cè)序反應(yīng)能達(dá)到90G以上的數(shù)據(jù)通量; • 準(zhǔn)確率高: ≥ 98.5%,同時(shí)也有效地解決了多聚重復(fù)序列的讀取問(wèn)題; • 低成本:比傳統(tǒng)毛細(xì)管測(cè)序技術(shù)成本的1%還低; • DNA序列的讀取長(zhǎng)度不斷增加,當(dāng)前達(dá)到300 bp; • 可以進(jìn)行Pair-End雙向測(cè)序,目前Pair-End文庫(kù)插入片段大小范圍可由200bp到10kb; • 每張芯片有8個(gè)通道,每個(gè)通道可單獨(dú)測(cè)序一個(gè)樣品,也可以把多個(gè)樣品混合在一起測(cè)序。
應(yīng)用領(lǐng)域:
• 全基因組測(cè)序(重測(cè)序) • BAC重測(cè)序 • 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序 • 宏基因組測(cè)序 • 基因表達(dá)譜 • 小RNA測(cè)序 • ChIP-Seq測(cè)序 |