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SNP在動(dòng)植物遺傳育種中的研究解決方案

       SNP是指在基因組上單個(gè)核苷酸的變異,SNP最重要的特點(diǎn)是數(shù)量很多,分布廣泛,此外它還具有雜合率低、遺傳穩(wěn)定性好,便于高通量自動(dòng)化監(jiān)測分析等特點(diǎn),因此SNP標(biāo)記可作為目標(biāo)性狀相關(guān)位點(diǎn)定位(遺傳圖譜,QTL定位,GWAS)、分子育種 (基因組選擇育種,分子標(biāo)記輔助育種)、群體進(jìn)化(選擇信號分析)等研究的工具。
 
  1. 1.    目標(biāo)性狀相關(guān)位點(diǎn)定位---QTL定位
       QTL,又稱數(shù)量性狀座位,一個(gè)QTL指在基因組中占據(jù)一定染色體區(qū)域,控制同一性狀的一組微效多基因的集合或單個(gè)基因。但是目前的研究中大部分將QTL理解為單個(gè)基因(或主效基因)。 QTL的實(shí)質(zhì)是通過分析整個(gè)染色體組的遺傳標(biāo)記和數(shù)量性狀表型值的關(guān)系,將一個(gè)或多個(gè)QTL定位到位于同一染色體的遺傳標(biāo)記旁。目前,基于全基因組重測序的混池測序方法可以對質(zhì)量性狀單基因和數(shù)量性狀主效基因進(jìn)行快速定位。

QTL定位的傳統(tǒng)研究路線
 

基于高通量測序的QTL定位研究路線
 
  1. 2.    目標(biāo)性狀相關(guān)位點(diǎn)定位---候選基因或位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析
       關(guān)聯(lián)分析,亦稱作連鎖不平衡作圖,這種方法主要基于兩個(gè)位點(diǎn)間等位基因的非隨機(jī)共分離現(xiàn)象,利用群體內(nèi)的原始重組和自然變異來研究數(shù)量性狀。與基于兩個(gè)親本雜交形成的作圖群體的QTL定位相比,關(guān)聯(lián)分析側(cè)重于研究個(gè)體之間彼此并無關(guān)系的自然群體,因此比連鎖分析具有更高的作圖精度,可以直接找到目標(biāo)基因變異,因而被廣泛應(yīng)用于復(fù)雜數(shù)量性狀的遺傳分析。關(guān)聯(lián)分析可以分為全基因組關(guān)聯(lián)分析和候選基因或位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析,其中候選基因或位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析是對性狀相關(guān)調(diào)節(jié)通路關(guān)鍵酶基因或位點(diǎn)進(jìn)行分子標(biāo)記的關(guān)聯(lián)分析研究。通過關(guān)聯(lián)分析發(fā)掘的功能型分子標(biāo)記可應(yīng)用于分子遺傳育種中的分子標(biāo)記輔助選擇(MAS)。

候選基因或位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析的研究路線
 
 
  1. 3.    目標(biāo)性狀相關(guān)位點(diǎn)定位---全基因組關(guān)聯(lián)分析
       全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS)是對遺傳多樣性豐富的自然群體的每個(gè)個(gè)體進(jìn)行全基因組重測序或者全基因芯片掃描,結(jié)合表型數(shù)據(jù)采用數(shù)據(jù)模型進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)分析,從而獲得目標(biāo)性狀關(guān)聯(lián)位點(diǎn)或者候選基因。目前GWAS已經(jīng)成為動(dòng)植物多個(gè)復(fù)雜性狀同時(shí)進(jìn)行精細(xì)定位的有力工具,在全基因組范圍內(nèi)篩選有可能會與農(nóng)藝性狀(株高、分蘗數(shù)、穗粒數(shù)、千粒重等)和經(jīng)濟(jì)性狀(肉質(zhì)、產(chǎn)奶量、產(chǎn)蛋量、產(chǎn)肉量等)相關(guān)的變異位點(diǎn),能夠?yàn)橄乱徊交虻墓δ苎芯?、?biāo)記輔助選擇等工作提供分子理論依,同時(shí)為進(jìn)一步培育優(yōu)質(zhì)的品系積累分子資料。

GWAS定位的研究路線
  1. 4.    分子育種分子標(biāo)記輔助
       傳統(tǒng)育種首先是通過各種途徑創(chuàng)造遺傳變異,然后從分離群體的后代中進(jìn)行優(yōu)化選擇和評價(jià)。因此傳統(tǒng)育種選擇是建立在植株的表型基礎(chǔ)上,這就要求育種工作者必須有豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。分子標(biāo)記輔助選擇(MAS) 不直接利用性狀本身信息,而是利用分子標(biāo)記與決定目標(biāo)性狀基因緊密連鎖的特點(diǎn),通過檢測分子標(biāo)記,即可檢測到目的基因的存在,達(dá)到選擇目標(biāo)性狀的目的,具有快速、準(zhǔn)確、不受環(huán)境影響的優(yōu)點(diǎn),從而加快育種速度,節(jié)省田間試驗(yàn)開支,對于低遺傳力性狀和難以測量的性狀具有更大的優(yōu)勢。可應(yīng)用于目標(biāo)性狀的分子標(biāo)記輔助選擇和分子標(biāo)記輔助回交。

  1. 1.    目標(biāo)性狀的分子標(biāo)記輔助選擇
       利用與目標(biāo)性狀緊密連鎖的SNP標(biāo)記對育種后代的分離群體進(jìn)行選擇,例如一個(gè)分子標(biāo)記的等位基因X與小麥白葉枯病抗病性緊密連鎖,等位基因Y與感病性連鎖,如果育種后代個(gè)體檢測到等位基因X,則這個(gè)個(gè)體可能對小麥白葉枯病產(chǎn)生抗病性。

  1. 2.    分子標(biāo)記輔助回交
       標(biāo)記輔助回交又稱標(biāo)記輔助導(dǎo)入,即將與目標(biāo)性狀相關(guān)聯(lián)的基因從供體材料導(dǎo)入到受體育種材料最有效的技術(shù)路徑,適用于自交系或品種的性狀改良; 不但可以對導(dǎo)入片段進(jìn)行選擇,又可加速輪回親本基因組的恢復(fù)即背景選擇,即依靠標(biāo)記對后代個(gè)體進(jìn)行全基因組選擇,加速育種進(jìn)程,提高選擇效率。

分子標(biāo)記輔助的研究路線
  1. 5.    分子育種基因組選擇
       分子標(biāo)記輔助只關(guān)注主效基因帶來的變異,而小效應(yīng)累加起來所帶來的變異卻被忽視了,為了捕獲構(gòu)成表型的所有遺傳變異,需要在基因組水平上檢測影響目標(biāo)性狀的所有QTL 并對其加以利用,這就是全基因組選擇(GS)。基因組選擇是利用具有表型和基因型的個(gè)體來預(yù)測只具有基因型不具有表型值動(dòng)物的基因組育種值(GEBV),育種值高,該個(gè)體所含的優(yōu)良基因可遺傳的物質(zhì)就多,產(chǎn)生優(yōu)良后代的可能性越高?;蚪M選擇優(yōu)勢是它能夠在得到動(dòng)物剛出生時(shí)即對其進(jìn)行育種值評估,因此利用基因組選擇可以縮短世代間隔,從而加快遺傳進(jìn)展并且降低經(jīng)濟(jì)投入。
全基因組選擇主要利用的是連鎖不平衡信息,即假設(shè)每個(gè)標(biāo)記與其相鄰的QTL 處于連鎖不平衡狀態(tài),因而利用標(biāo)記估計(jì)的染色體片段效應(yīng)在不同世代中是相同的。由此可見,標(biāo)記的密度必須足夠高,以確??刂颇繕?biāo)性狀的所有的QTL 與標(biāo)記處于連鎖不平衡狀態(tài)。 另外遺傳力高低,表型記錄個(gè)體數(shù) ,參考群體與候選群體間的關(guān)系 以及參考群體內(nèi)的親緣關(guān)系都會影響基因組選擇的準(zhǔn)確度。

基因組選擇的研究路線
 
  1. 6.    群體進(jìn)化選擇信號分析
       選擇即是在世代的傳遞過程中,因?yàn)樽匀贿x擇,人工馴化等因素會使某種基因型個(gè)體的比例發(fā)生變化的群體遺傳學(xué)現(xiàn)象。在選擇的作用下,群體有利等位基因頻率則會在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到一個(gè)較高的值,同時(shí)選擇作用下的連鎖不平衡會造成選擇位點(diǎn)附近的中性位點(diǎn)的基因頻率隨之增加形成長范圍的單倍型純合,群體遺傳學(xué)中,將這種由選擇作用造成的部分染色體片段的多態(tài)性降低稱為選擇性掃除,與選擇相對應(yīng)的基因組信息被稱為“選擇信號”,選擇性掃除是選擇在基因組上留下的明顯特征,一般表現(xiàn)為基因的純合以及某些位點(diǎn)或 DNA 片段多態(tài)的降低。研究人工選擇不僅能夠探究影響品種多樣性的潛在遺傳機(jī)制,而且還能精細(xì)定位部分受到選擇且與質(zhì)量性狀相關(guān)的功能基因或者與重要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的主效基因,這是因?yàn)檫x擇信號潛在區(qū)域多與性狀相關(guān)的重要候選基因重疊,因此基因組選擇信號的檢測對研究物種馴化過程和開展育種規(guī)劃具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。

選擇信號分析的研究路線
 
  1. 7.    品種資源鑒定—DNA條形碼鑒定
       DNA 條形碼技術(shù)(DNA barcoding)是利用有足夠變異的、 易擴(kuò)增且相對較短的 DNA 片段自身在物種種內(nèi)的特異性和種間的多樣性而創(chuàng)建的一種新的生物身份識別系統(tǒng),它可以不受形態(tài)特征和生物個(gè)體發(fā)育時(shí)期的限制,能夠?qū)ξ锓N進(jìn)行快速的鑒定,DNA 條形碼在物種鑒定與分類、種群遺傳、快速查驗(yàn)有害生物及入侵種、發(fā)現(xiàn)新物種和保護(hù)生物多樣性、瀕危物種保護(hù)等研究領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。在動(dòng)物中COI基因常被用作DNA條形碼,在植物中3個(gè)質(zhì)體基因 (rbcLmatK和 trnH-psbA) 以及核糖體基因 (ITS) 常被用作DNA條形碼,但是一般會根據(jù)所研究的物種選擇最合適的DNA條形碼組合,因?yàn)檫@些常用的DNA條形碼也有PCR擴(kuò)增率低,引物通用性差等問題。

DNA條形碼鑒定的研究路線
 
 
       天昊生物提供多種創(chuàng)新的SNP檢測方法,涵蓋了從低通量、中等通量到高通量的完整SNP分型平臺,客戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的樣本和分子標(biāo)記規(guī)模選擇最優(yōu)的SNP檢測技術(shù)。
a:單次實(shí)驗(yàn)可同時(shí)檢測的樣本  b:單次實(shí)驗(yàn)可同時(shí)檢測的分子標(biāo)記數(shù)目  c:控制最優(yōu)實(shí)驗(yàn)成本所需的最小樣本起始量 d:單個(gè)樣品單次檢測中一個(gè)位點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)成本  e:檢測方法的技術(shù)基礎(chǔ)和平臺  f:單次實(shí)驗(yàn)從DNA到實(shí)驗(yàn)結(jié)果解讀的時(shí)間  ★ 天昊生物的創(chuàng)新技術(shù)
 
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